影響光學顯微鏡分辨率的因素主要包括以下幾個方面：

衍射和散射：

衍射：當光線通過孔徑較小的物體時，會出現衍射現象，導致圖像的模糊。這是光學顯微鏡分辨率的主要限制因素之一。

散射：光線在物體表面受到散射，導致圖像的失真和模糊。例如，生物樣品中的細胞內部細小結構會造成光的散射，影響觀察的清晰度。

波長：

分辨率的決定因素之一是觀察光的波長。可見光的波長范圍大約在400到700納米之間，限制了光學顯微鏡分辨比波長小得多的細小結構的能力。

分辨極限通常等于波長的一半，以450nm的藍光為例，其分辨極限大約為0.225μm。

數值孔徑（NA）：

數值孔徑是光學顯微鏡鏡頭的一個參數，衡量了顯微鏡鏡頭的光采集和聚焦能力。較高的數值孔徑意味著更大的分辨率。

通過使用具有更大數值孔徑的鏡頭，可以提高顯微鏡的分辨率。例如，干燥系物鏡的NA為0.050.95，油鏡的NA為0.851.4。

折射率差異：

樣品中不同部分的折射率差異（如細胞核、細胞質和細胞器等）也會影響分辨率，這些差異有助于提高細節的可見性。

光學畸變：

光學畸變包括像差和球差等，可能會降低分辨率。高質量的顯微鏡和鏡頭設計可以減小這些畸變，提高分辨率。

照明光線的波長：

顯微鏡的分辨距離與照明光線的波長直接相關。較短的波長可以提供更高的分辨率。因此，選擇較短波長的光源（如藍光）可以提高分辨率。

介質折射率：

介質（如空氣或油）的折射率也會影響顯微鏡的分辨率。使用高折射率的介質（如油鏡）可以提高數值孔徑，進而提高分辨率。

總結來說，光學顯微鏡的分辨率受到多種因素的影響，包括衍射和散射、波長、數值孔徑、折射率差異、光學畸變以及照明光線的波長和介質折射率等。為了提高分辨率，可以選擇較短波長的光源、使用高數值孔徑的鏡頭以及優化顯微鏡和鏡頭的設計等。