光學顯微鏡成像受到多種因素的影響，這些因素可以歸納為以下幾個方面：

一、被檢物體準備

切片厚度：切片厚度是否適中非常關鍵，過厚的切片會導致光線穿透困難，影響成像清晰度。

蓋玻片質量：蓋玻片是否符合國家標準，其平整度、清潔度等都會影響成像質量。

二、顯微鏡硬件因素

物鏡檔次：物鏡按檔次可分為多個級別，常用的為平場消色差物鏡。物鏡檔次低會導致成像質量下降，因此建議選擇較G檔次的物鏡。

聚光鏡孔徑光欄：聚光鏡孔徑光欄應與物鏡的數值孔徑相匹配，以獲得Z佳的圖像分辨率。

調焦系統：調焦系統的精度對成像質量有重要影響。熟練的操作者能快速找到圖像并聚焦，提高工作效率。

載物臺：載物臺的精度和穩定性影響成像質量。雙層機械移動平臺通常具有較好的精度和穩定性。

非球面集光鏡：能提供非常均勻的照明光線，使得觀察到的顯微圖像襯度J佳。

三、光學相差

色差：多色光為光源時，由于各種光的波長不同，在通過透鏡時的折射率也不同，導致物方一個點在像方形成色斑，影響成像清晰度。

球差：軸上點的單色相差，由于透鏡的球形表面造成，使得一個點成像后不是亮點，而是一個中心亮、邊緣模糊的亮斑。

慧差：軸外點的單色相差，導致光點的像形成逗點狀，影響成像質量。

像散：軸外點單色相差，使物點在成像后變成兩個分別且相互垂直的短線，形成橢圓形斑點。

場曲：透鏡存在場曲時，整個光束的交點不與理想像點重合，導致整個像平面是一個曲面，影響觀察。

四、其他因素

數值孔徑（NA）：描述了透鏡收光錐角的大小，是判斷物鏡性能的關鍵指標，影響分辨率、焦點深度、鏡像亮度等。

分辨率：能被顯微鏡清晰區分的兩個物點間的Z小距離，是顯微鏡能否看清楚小物體或細節的關鍵。

光通量：物鏡決定進入系統的光通量，影響視野亮度和成像質量。

使用環境：顯微鏡應放置在干燥清潔的房間，避免光學部件發霉、金屬部分生銹以及粘滿灰塵。同時，避免與腐蝕性化學品接觸，防止損壞。

綜上所述，光學顯微鏡成像受到被檢物體準備、顯微鏡硬件因素、光學相差以及其他多種因素的影響。在實際使用中，需要綜合考慮這些因素，以獲得高質量的成像效果。