一、實驗目的
了解細胞骨架的結構特征及其制備技術。
二、實驗原理
細胞骨架（cytoskeleton）是由蛋白質絲組成的復雜網狀結構，根據其組成成分和形態結構可分為微管、微絲和中間纖維。它們對細胞形態的維持，細胞的生長、運動、分裂、分化，物質運輸，能量轉換，信息傳遞，基因表達等起到重要作用。當用適當濃度的Triton
X-100處理細胞時，可將細胞質膜中和細胞質中的蛋白質和全部脂質被溶解抽提，但細胞骨架系統的蛋白質不受破壞而被保存，經用戊二醛固定，考馬斯亮藍
R250染色后，可在光學顯微鏡下觀察到由微絲組成的微絲束為網狀結構，就是細胞骨架。
三、實驗器材、藥品
材料：洋蔥鱗莖。
器材：普通光學顯微鏡、滴瓶、容量瓶、試劑瓶、燒杯、載玻片、蓋玻片、鑷子、小剪刀、吸水紙、擦鏡紙。
藥品：
（1）M緩沖液（加水定容到1000ml）
| 試劑名稱 | 終濃度 | 每升加量 |
| 咪唑 | 50mmol/L | 3.4g |
| 氯化鉀 | 50mmol/L | 3.73g |
| 氯化鎂 | 0.5mmol/L | 0.1g |
| EGTA | 1mmol/L | 0.38g |
| EDTA | 0.1mmol/L | 0.04g |
| 巰基乙醇 | 1mmol/L | 70ul |
| 甘油 | 4.0mol/L | 294.8ml |
（2）磷酸緩沖液(pH 6.8)：0.2 mol／L 磷酸緩沖液，用NaHCO3調至 pH6.8。
（3）1%Trion X-100：用M緩沖液配制.
（4）0.2％考馬斯亮藍R250：其溶劑為甲醇46.5ml，冰醋酸7ml，蒸餾水46.5ml。
（5）3%戊二醛：用0.2 mol／L磷酸緩沖液配。
四、實驗步驟
1.取洋蔥鱗莖切成大小約0.5cm2的塊狀，置磷酸緩沖液內浸泡3－10小時；
2.將浸泡后的鱗莖小塊移動到1％的Trion X-100中處理30min；
3.用M-緩沖液洗3次，每次5分鐘；
4.放入3％戊二醛中固定30分鐘；
5.磷酸緩沖液洗3次，每次2min；
6.考馬斯亮藍染色30分鐘；
7.水洗、鋪展、裝片、鏡檢。
